簡要描述：本產品是可用于凍存以小鼠 ES 細胞為代表的各種通用細胞株的無血清型細胞凍存液。含 BSA 和 10% DMSO 。標準測試中用小鼠 ES 細胞 D3 株凍存、復蘇，確認其細胞存活率。本產品采用緩慢凍存法凍存細胞，無需使用程序降溫盒。
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人iPS 細胞·小鼠 ES 細胞凍存用
StemSure® 細胞凍存液 Update！！
本產品是可用于凍存以小鼠 ES 細胞為代表的各種通用細胞株的無血清型細胞凍存液。含 BSA 和 10% DMSO 。標準測試中用小鼠 ES 細胞 D3 株凍存、復蘇，確認其細胞存活率。本產品采用緩慢凍存法凍存細胞，無需使用程序降溫盒。
使用本產品對小鼠 ES 細胞 D3 株在 -80℃ 進行保存，可凍存２年；普通細胞在 -150℃ 下可凍存 30 個月，并且可維持很高的存活率。
另外，本產品已確認可用于凍存人 iPS 細胞。
◆特點
● 可在維持人 iPS 細胞、小鼠 ES 細胞未分化能力的狀態下，直接進行凍存。
● 可在 -80℃ 下進行長時間凍存。
● 凍存的通用動物細胞株的細胞存活率好。
● 無血清型
● 無需自行配制試劑
● 無需使用程序降溫盒
◆測試項目
● 細胞存活率時間（使用小鼠 ES 細胞 D3 株進行實驗）
● 無菌實驗
● 內毒素實驗
● 支原體實驗
◆使用方法
人 iPS 細胞的凍存
1. 凍存
① 去除人 iP S細胞培養皿中的營養液，用 PBS 清洗后，用 Accutase 等剝離細胞。
② 添加含有 10 μmol/L Y-27632的人 iPS 培養基（hPSC 培養基（+ROCKi）），用移液器吹打成單細胞。
③ 將吹打分散的細胞懸浮液移至樣本管，離心（1,000 rpm，3 min，室溫）后去除上清液。
④ 添加含 hPSC 培養基（+ROCKi）的培養基，用移液器懸浮。
⑤ 計算細胞數量。
⑥ 以１×106 cells/管分注在細胞懸浮液保存管中。
⑦ 離心（1,000 rpm，3 min，室溫）后去除上清液。
⑧ 使用 50 μL/管本產品進行懸浮，在 -80℃ 下進行凍存。
2. 復蘇
① 在凍存管中添加 hPSC 培養基（+ROCKi），復蘇凍結細胞（不使用溫水浴法）。
② 離心（1,000 rpm，3 min，室溫）后去除上清，再次添加 hPSC 培養基（+ROCKi），懸浮。
③ 計算細胞數量。
④ 在培養皿中按照２×105 cells/6 cm 進行細胞培養。
小鼠ES細胞、通用動物細胞株的凍存
1. 凍存
① 收集細胞至樣本管中。
② 離心，去除上清。
③ 在樣本管中加入本產品，懸浮。
④ 分注至懸浮液保存管中。
⑤ 將保存管在-80℃凍潔一晚。
⑥ 保存于-150℃或-80℃
2. 復蘇
① 將凍存管置于37℃的水浴槽中解凍。
② 在培養用的培養基中進行懸浮。
③ 離心去除上清后用培養基進行重懸。
④ 在培養容器內培養細胞。
◆人iPS 細胞 201B7 細胞系的凍存 Update！！
將人 iPS 細胞 201B7 株分散為單細胞后，在 StemSure® 凍存液中懸浮，并在-80℃下凍存４天。反復凍結、復蘇３次之后，確認細胞存活率和各種未分化標記（Oct3/4、Sox2、SSEA-4、Tra-1-81）的表達。
細胞生存率
未分化標記表達的確認
◆小鼠 ES 細胞 D3 細胞系的凍存
-150℃保存（30個月）
-80℃保存（24個月）
<凍存>
① 在 1 mL本產品中懸浮１~2×106 cells，分注至凍存管中。
② 在 -80℃凍存１天后轉移至-150℃凍存。或者在-80℃凍存。
<復蘇>
③ 在37℃的溫浴槽中復蘇。
④ 在細胞培養基中懸浮、離心。
⑤ 棄上清，用細胞培養基重懸細胞并進行培養。
○確認細胞集落形成
培養細胞數：500個細胞/孔（含膠原蛋白涂層的６孔板）
培養時間：10天
◆凍存通用動物細胞系后的細胞存活率
用 StemSure® 細胞凍存液凍存各種動物細胞株。可確認到凍存30個月后仍維持高存活率，且復蘇后細胞可移植。
細胞種類 | 存活率（%） | 細胞移植 | ||
2個月 | 4個月 | 30個月 | ||
人 | ||||
HeLa | 97 | 93 | 97 | ○ |
293T | 96 | 95 | 95 | ○ |
K562 | 91 | 84 | 84 | ○ |
靈長類 | ||||
COS-7 | 97 | 93 | 92 | ○ |
Vero | 95 | 94 | 91 | ○ |
狗 | ||||
MDCK | 98 | 99 | 100 | ○ |
小鼠 | ||||
NIH/3T3 | 93 | 93 | 89 | ○ |
P19 | 93 | 76 | 77 | ○ |
STO | 90 | 91 | 91 | ○ |
L929 | 94 | 90 | 91 | ○ |
倉鼠 | ||||
CHO | 97 | 96 | 98 | ○ |
<凍存>
① 在 1 mL本品中懸浮 1~2×106 cells，分注至凍存管中。
② 在-80℃凍存1天后轉移至-150℃分別凍存２個月、４個月、30個月。
<復蘇>
③ 在37℃的水浴槽中復蘇。
④ 細胞培養用培養基中懸浮、離心。
★其他凍存液★
產品編號 | 產品名稱 | 規格 | 容量 |
031-24051 | CultureSure™ DMSOCultureSure™ 二甲基亞砜 | 細胞培養用 | 10 mL×10 |
039-23511 | CultureSure™ Freezing Medium | 細胞培養用 | 10 mL |
◆相關產品
★StemSure® 系列★
本系列產品適用于培養 ES 細胞和 iPS 細胞。每個批次產品都適用小鼠 ES 細胞 D3 細胞系進行品質實驗檢測。
產品編號 | 產品名稱 | 規格 | 容量 |
197-16275 | StemSure® D-MEM (High Glucose) with Phenol Red and Sodium Pyruvate | 細胞培養用 | 500 mL |
191-18375 | Stemsure® Serum Replacement | 細胞培養用 | 500 mL |
198-15781 | StemSure® 10 mmol/L 2-Mercaptoethanol Solution ( × 100) | 細胞培養用 | 100 mL |
195-15791 | StemSure® 50 mmol/L Monothioglycerol Solution ( × 100) | 細胞培養用 | 100 mL |
190-15805 | StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution | 細胞培養用 | 500 mL |
199-16051 | StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution | 細胞培養用 | 106 units |
195-16053 | StemSure® LIF, Mouse,recombinant, Solution | 細胞培養用 | 106 units×10 |
★rBC2LCN-FITC★
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無動物源成分的干細胞凍存液，請點擊：StemSure® hPSC凍存液, AF
| 產品編號 | 產品名稱 | 產品規格 | 產品等級 | 備注 |
| 195-16031 | StemSure Freezing Medium StemSure細胞凍存液 | 100 mL | - | - |
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